对于细胞培养而言,胎牛血清(FBS)是最常用的,由于FBS关乎细胞活力和实验重复性等重要的参数,故在质量方面是绝对不能含糊的。若质量不稳定,则有可能导致实验失败。

但是对于科研人员来说,最头疼的是目前国内外血清品牌鱼龙混杂,价格参差不齐,特别是刚接触细胞培养的人,难以分辨血清质量的优劣。一不小心买到假货或劣质血清,有时候对于实验结果简直是毁灭性的。

之前很多网友咨询我,如何从琳琅满目的血清品牌中挑选出质优价廉的血清品牌。这里我就做一些总结:可以从外观、主要质量标准、使用便捷性等各个方面来考察:

一、外观

购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,待溶解完成,我们观察到的胎牛血清会表现出黄色或红色。并不是越红越好,也不是越黄越好,淡黄色到淡红色才是比较正常的颜色范围。

很多培养细胞的宝宝会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题。

那么,血清中可能出现的沉淀物是什么?

① 纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到1-2mm,可以用肉眼观察到。

② 磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。

③ 胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质,它们也是血清中出现沉淀物的常见原因。关于细胞生长,其实很多试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,当然血清生产商也是这样说的。

二、血清的主要质量标准

(一)低内毒素,无细菌、支原体、噬菌体、病毒等污染。

(二)无外源添加因子,不含激素、抗生素等。

(三)经过上百种细胞株和近百种原代细胞的验证,细胞状态良好。优质的、负责的血清品牌,都会做多细胞培养鉴定,观察细胞生长状态,做多项、多批次横向对比,才能最终验证。

三、使用便捷性

1.对于包装规格来说,常见的血清有500ml、100ml和50ml装的。各有优势。

500ml适合一次性大量使用的,订购和储存更方便。

100ml适合每次中等规模细胞培养使用的。

50ml分装的就更适合每次小量细胞培养,也是现在比较流行的包装方式,它有以下的好处:

❥50mL独立包装,告别分液,降低污染风险和研究结果受损机率;

❥免去分装步骤,50ml瓶装只需冻融一次,大幅节省时间和精力;

❥人性化的瓶口和斜切角边缘设计,确保倾倒顺畅无气泡,轻松倾注和移液做到一滴不剩;

❥经过优化设计的包装,占用空间更小,减轻冰箱的容量负担;

❥减少分装到锥形管中的步骤,降低耗材使用量,实验室生产效率提升的同时更加环保;

四、常见品牌使用体验对比

一、Gibco

老牌了,质量稳定性毋庸置疑,老板经费比较多的时候,是我的首选,但也有三个让科研宝宝们头疼不已的问题:

第一,太贵了!不过有钱的主请随意。

第二,货期不稳定,断货的时候宝宝们最头疼了,那么贵,又不可能买太多备着,当断货的时候真的欲哭无泪~

第三,假货太多了!这一点对科研小白太不友好了,建议宝宝们要找正规经销商、代理商采购哦。

二、BI

有段时间市场占有率还是挺高的,我也用过几次,有一次好像买到的还是假货还是怎么的,细胞被污染了。现在据说停产了,心疼习惯用BI的宝宝们一秒。不过幸好现在血清品牌比较多,也有不少是可以替代BI的。

三、Celltop

国产新品牌,美国博士团队出品,南美血源,做了300多种细胞的培养测试,基本上满足常见的干细胞、内皮细胞、上皮细胞、神经细胞、软骨细胞、肌细胞、成纤维细胞等细胞系及其他类型原代细胞培养。在国产血清中表现不错,大部分细胞的培养表现接近gibco的状态,在我老板经费告急的时候,我在研选lab商城看到的,拿来应急,结果意外的发现好用,就一直用了。除了细胞状态不错,最让我觉得好用的是它是已经分装好的50ml小包装,不用我每次分装了,也避免反复冻融,很贴心的设计。(最开始也是大包装,现在都是独立小包装了)

四、四季清

国产老牌了,我们隔壁实验室经常用的,有一次我的血清库存没有了,没来得及订,借用了一小瓶,还可以,但是发现折算下来算是国产里面比较贵的了。

五、Bovogen

最开始筛选血清的时候也用过几瓶,表现还不错,中规中矩吧。

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